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Type: Dissertação
Title: ClTI, um inibidor de tripsina tipo KUNITZ purificado a partir de sementes de Cassia leiandra BENTH., exerce efeito candidicida, induzindo estresse oxidativo e apoptose celular em C. albicans
Title in English: ClTI, a kunitz trypsin inhibitor purified from Cassia leiandra Benth. seeds exerts anticandidicidal effect on Candida albicans by inducing oxidative stress and apoptosis
Authors: Araújo, Nadine Monteiro Salgueiro
Advisor: Oliveira, José Tadeu Abreu de
Keywords: Cassia leiandra;Inibidor de tripsina;Proteína anticandida;Candida albicans
Issue Date: 2019
Citation: ARAÚJO, Nadine Monteiro Salgueiro. ClTI, um inibidor de tripsina tipo KUNITZ purificado a partir de sementes de Cassia leiandra BENTH., exerce efeito candidicida, induzindo estresse oxidativo e apoptose celular em C. albicans. 2019. 75 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2019.
Abstract in Brazilian Portuguese: Inibidores de protease são biomoléculas multifuncionais encontradas em todos os organismos, responsáveis por inibir a ação catalítica de enzimas envolvidas em importantes processos fisiológicos e patológicos. Estas moléculas podem ser utilizadas como ferramenta biotecnológica para o controle de infecções microbianas. Em ambiente hospitalar, leveduras oportunistas do gênero Candida protagonizam um sério problema de saúde pública no mundo. Estes microrganismos tornaram-se resistentes aos antimicóticos tradicionais e são responsáveis por altas taxas de mortalidade. Diante da necessidade emergencial por terapias antimicrobianas novas, a prospecção e a caracterização da atividade biológica de moléculas antifúngicas, principalmente aquelas de origem vegetal, têm se intensificado. Neste contexto, vários inibidores de proteases já foram isolados a partir de plantas medicinais e demonstraram promissor efeito anticandida. Em estudo anterior, um inibidor de tripsina do tipo Kunitz, intitulado ClTI, foi purificado das sementes de Cassia leiandra Benth. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do ClTI sobre diferentes espécies de Candida, investigar o modo de ação antifúngico deste inibidor e avaliar sua toxicidade frente a células humanas. O ClTI inibiu a multiplicação celular de Candida albicans, Candida tropicalis, Candida parapsilosis e Candida krusei em intensidades diferentes, mas seu efeito fungicida foi maior para C. albicans. Na dose correspondente à MIC50 (2,1 μM) para C. albicans causou alterações morfológicas, alterou a permeabilização da membrana plasmática e alterou o bombeamento de prótons para o meio extracelular. O inibidor induziu, ainda, a geração aumentada de espécies reativas de oxigênio, foi capaz de degradar o material genético e exibiu atividade antibiofilme. Em células humanas tratadas com ClTI não foram observados sinais de toxicidade. Os dados obtidos demostram que o ClTI apresenta grande potencial para vir a se tornar, futuramente, um produto médico para o tratamento de infecções hospitalares causadas por C. albicans.
Abstract: Protease inhibitors are multifunctional biomolecules found in all organisms responsible for inhibiting the catalytic action of enzymes involved in important physiological and pathological processes. These molecules can be used as a biotechnological tool for the control of microbial infections. In a hospital environment, opportunistic yeasts of the genus Candida carry a serious public health problem in the world. These microorganisms have become resistant to traditional antimycotics and are responsible for high rates of morbidity and mortality. The view of the urgent need for new antimicrobial therapies, the prospection and characterization of the biological activity of antifungal molecules, especially from vegetable, has intensified. In this context, several protease inhibitors have already been isolated from medicinal plants and have shown a promising anticandidal effect. In a previous study, a Kunitz trypsin inhibitor, ClTI, was purified from the seeds of Cassia leiandra Benth. The objective of this work is to evaluate the effect of ClTI on different Candida species, to investigate it mode of antifungal action and to evaluate its toxicity against human cells. ClTI interrupted the cell multiplication of Candida albicans, Candida tropicalis, Candida parapsilosis and Candida krusei at different intensities, demonstrating potent fungicidal effect for C. albicans. At the dose of MIC50 (2.1 μM) caused morphological changes, permeabilized the plasma membrane and altered the pumping of protons in C. albicans cells. For the same species, the inhibitor still induced the increased generation of reactive oxygen species, was able to degrade the genetic material and exhibited antibiofilm activity. No signs of toxicity were observed in human cells treated with ClTI. The data obtained demonstrate that the C. leiandra inhibitor has a great anticandidicidal potential, and may in the future become a medical product for the treatment of hospital infections caused by C. albicans.
URI: http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/40508
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